藥物的含量:指藥物中所含主成分的量，是評(píng)價(jià)藥物質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。

可供藥物含量測(cè)定的分析方法:

(1)容量分析法

①優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，方法耐用性高。

②缺點(diǎn):方法缺乏專(zhuān)屬性。

③適用:適用于對(duì)結(jié)果準(zhǔn)確度與精密度要求較高的樣品的測(cè)定。

(2)光譜分析法

①優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)便，快速，靈敏度高，并具有-一定的準(zhǔn)確度。②缺點(diǎn):方法專(zhuān)屬性稍差。

③適用:適用于對(duì)靈敏度要求較高、樣本量較大的分析項(xiàng)目。

(3)色譜分析法

①優(yōu)點(diǎn):高靈敏度與高專(zhuān)屬性，并具有一定的準(zhǔn)確度。

②缺點(diǎn):結(jié)果計(jì)算需要對(duì)照品。

③適用:適用于對(duì)方法的專(zhuān)屬性與靈敏度要求較高的復(fù)雜樣品的含量測(cè)定。3、為確保分析結(jié)果的可靠性，要求分析方法應(yīng)準(zhǔn)確、穩(wěn)定、耐用。

•方法選擇中的供試品因素

-化學(xué)原料藥的含量測(cè)定首選容量分析法

-藥物制劑的含量測(cè)定首選色譜分析法

-藥物制劑的定量檢查首選光譜分析法

•含量測(cè)定方法須準(zhǔn)確、穩(wěn)定、耐用

第一節(jié) 定量分析方法的分類(lèi)與特點(diǎn)

一 容量分析法:

•基本術(shù)語(yǔ)

-滴定：將滴定劑通過(guò)滴管滴入待測(cè)溶液中的過(guò)程

-滴定劑：濃度準(zhǔn)確已知的試樣溶液

-指示劑：滴定分析中能發(fā)生顏色改變而指示終點(diǎn)的試 劑

-滴定終點(diǎn)：滴定分析中指示劑發(fā)生顏色改變的那一點(diǎn) （實(shí)際）

-化學(xué)計(jì)量點(diǎn)：滴定劑與待測(cè)溶液按化學(xué)計(jì)量關(guān)系反應(yīng) 完全的那一點(diǎn)（理論）

-滴定誤差：滴定終點(diǎn)與化學(xué)計(jì)量點(diǎn)不一致產(chǎn)生的誤差

•特點(diǎn)

-方法簡(jiǎn)便易行

-方法耐用性高

-測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確

-方法專(zhuān)屬性差

•適用范圍：較多用于化學(xué)原料藥物的含量 測(cè)定

•有關(guān)計(jì)算:

-滴定度：

每1 ml某摩爾濃度的滴定液所相當(dāng)?shù)?被測(cè)藥物的重量。中國(guó)藥典用mg表示

-滴定度的計(jì)算

-含量的計(jì)算

/直接滴定法:

/所配制滴定液濃度與規(guī)定濃度不一致時(shí)：

/間接滴定法：生成物滴定法

/簡(jiǎn)接滴定法：剩余量滴定法

二、光譜分析法：

•紫外-可見(jiàn)分光光度法(200?400?760nm)

-朗伯-比耳定律

-E：?jiǎn)挝灰簩雍穸葧r(shí)的吸收度。有兩種表示法：

/摩爾吸收系數(shù)：在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1mol/L, 厚度為1cm時(shí)的吸收度。用e表示。

/百分吸收系數(shù)：在一定波長(zhǎng)下，溶液濃度為1%

(W/V),厚度為1cm時(shí)的吸收度。用E比表示。

-特點(diǎn)與適用范圍

/簡(jiǎn)便易行

/靈敏度高，可達(dá)10-4g/ml?10-7g/ml。

/準(zhǔn)確度較高，相對(duì)誤差為2%?5%。

/專(zhuān)屬性較差

/較少應(yīng)用于原料藥含量測(cè)定，多用于制劑的定量檢 查。

-儀器校正與檢定

/波長(zhǎng)：常用儀器中制:丁的486.02nm與656.10nm譜 線校正，或用欽玻璃的尖銳吸收峰。

/吸光度的準(zhǔn)確度：與規(guī)定的吸收系數(shù)比較。

/雜散光的檢查

/對(duì)溶劑的要求：截止波長(zhǎng)

/測(cè)定法：波長(zhǎng)掃描與吸光度讀數(shù)

-含量測(cè)定方法

/對(duì)照品比較法

/吸收系數(shù)法

/計(jì)算分光光度法

/比色法

•熒光分析法

-特點(diǎn)與適用范圍

/靈敏度高,可達(dá) 1010g/mH1012g/ml.

/濃度太大會(huì)有“自熄滅”作用，故適用于低濃度的 溶液。

/干擾因素多，須做空白試驗(yàn)。

/取樣少，方法快速。衍生化試劑提高了適用范圍

-干擾的排除

/溶劑：進(jìn)一步純化溶劑，空白試驗(yàn)

/溶液：適當(dāng)?shù)臐舛?，減少雜質(zhì)，降低溶氧，調(diào)節(jié)pH

/玻璃量器：高潔凈度

/溫度：穩(wěn)定的溫度

-含量測(cè)定

/相對(duì)定量方法測(cè)定

/線性范圍較窄

式中：Ci為供試品溶液的濃度，Cr為對(duì)照品溶液的濃度，Ri為供試品溶液 的讀數(shù)，Rib為供試品溶液試劑空白的讀數(shù)，Rr為對(duì)照品溶液的讀數(shù)，Rrb 為對(duì)照品溶液試劑空白的讀數(shù)。

三、色譜分析法：

?特點(diǎn)與適用范圍

-高靈敏度

-高專(zhuān)屬性

-高效能與高速度

-適用于藥物制劑，尤其復(fù)方制劑的含量測(cè)定。

•分類(lèi)

-依據(jù)分離原理：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、 分子排阻色潛等

-依據(jù)分離方式：紙色譜法，薄層色譜法，柱色譜法， 氣相色譜法，高效液相色譜法等

•高效液相色譜法

-藥品標(biāo)準(zhǔn)對(duì)HPLC方法改變的要求

-對(duì)儀器的一般要求：

-色譜柱：填料，孔徑與粒徑，柱直徑，溫度，pH等

-檢測(cè)器：通用型檢測(cè)器與選擇性檢測(cè)器，對(duì)流動(dòng)相 的要親

-流動(dòng)相：反相系統(tǒng)與正相系統(tǒng)

-系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

-色譜柱的理論塔板數(shù)

?色譜峰的分離度

?色譜系統(tǒng)的重復(fù)性:

?色譜峰的拖尾因子

d1為極大峰至峰前沿之間的距離。T應(yīng)在0.95-1.05之間。

-測(cè)定法：

1、外標(biāo)法：一點(diǎn)法；兩點(diǎn)法；工作曲線法

2、內(nèi)標(biāo)法

•氣相色譜法

-檢測(cè)器、固定液及特殊指定的色譜柱材料不能更換

-對(duì)儀器的一般要求

-載氣

-色譜柱填料，柱管材質(zhì)，固定液

-檢測(cè)器種類(lèi)，使用溫度

-進(jìn)樣方式

-系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

-測(cè)定法：多釆用內(nèi)標(biāo)法

第二節(jié) 樣品分析的前處理方法

樣品分析的前處理方法

•在分析含金屬或鹵素、氮、硫、磷等元素 的有機(jī)藥物前，需進(jìn)行適當(dāng)?shù)乃幤非疤幚怼?/p>

•分類(lèi)

-不經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法

-經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法

樣品分析的前處理方法

•不經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法

-直接測(cè)定法——含金屬或C-M不牢固的有機(jī)金屬藥物

•配位滴定法

•氧化還原滴定法

經(jīng)水解后測(cè)定法一鹵素聯(lián)脂肪碳鏈（溶于適當(dāng)溶劑再水解）

-堿水解后測(cè)定法

•酸水解后測(cè)定法

-經(jīng)氧化還原后測(cè)定法——鹵素聯(lián)芳環(huán)牢固（一般用于測(cè)碘）

•經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法

-濕法破壞

•硫酸-硫酸鹽法——凱氏定氮法

•硝酸-高氯酸法

•硝酸-硫酸法

•其它濕法

-干法破壞

•高溫?zé)胱品?/p>

•氧瓶燃燒分解后測(cè)定法

-硫酸-硫酸鹽法——凱氏定氮法

•將含氮藥物與硫酸在凱氏定氮燒瓶中共熱，藥物分子 中有機(jī)結(jié)構(gòu)被氧化分解（亦稱(chēng)“消解”或“消化”） 成二氧化碳和水，有機(jī)結(jié)合的氮?jiǎng)t轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)氮，并 寫(xiě)過(guò)量的硫發(fā)結(jié)合另寵磋氫程及硫發(fā)鉉，經(jīng)氫童化鈉 堿化后釋放出氮?dú)?，并隨水蒸氣餡出，用祖酸渣液或 定墨的酸滴定液吸收后，再用酸或堿滴定疲滴是。

-高溫?zé)胱品?/p>

-將含待測(cè)元素的有機(jī)藥物經(jīng)高溫灼燒灰化，使有機(jī)結(jié) 構(gòu)分解而待測(cè)元素轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)元素或可溶性無(wú)機(jī)鹽， 以供分析。根據(jù)分析對(duì)象與目的不同，常加無(wú)水碳酸 鈣、硝酸鎂、氫氧化鈣、氧化鋅等輔助灰化。

-氧瓶燃燒法

第三節(jié)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證

•方法驗(yàn)證的目的

•需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目：鑒別試驗(yàn)；雜質(zhì)定量 或限度檢查；含量測(cè)定等

•驗(yàn)證內(nèi)容：準(zhǔn)確度；精密度；專(zhuān)屬性；檢 測(cè)限/定量限；線性及范圍；耐用性等

1、準(zhǔn)確度

•含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度

-原料藥的含量測(cè)定

-制劑的含量測(cè)定

•雜質(zhì)定量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度

-使用雜質(zhì)對(duì)照品

-缺少雜質(zhì)對(duì)照品

•數(shù)據(jù)要求

2、精密度

•標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）

•驗(yàn)證內(nèi)容:重復(fù)性/中間精密度/重現(xiàn)性

•數(shù)據(jù)要求

3、專(zhuān)屬性

•鑒別反應(yīng)

•含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定

-陰性對(duì)照

-陽(yáng)性對(duì)照

-純度測(cè)試

4、檢測(cè)限/定量限

•檢測(cè)限常用方法

-目視法：非儀器法

-信噪比法：色譜法

-標(biāo)準(zhǔn)偏差法：光譜法

•定量限：信噪比要求不同

•數(shù)據(jù)要求

5、線性及范圍

•線性

-回歸方程

-相關(guān)系數(shù)

•范圍

-原料藥和制劑含量測(cè)定

-制劑含量均勻度檢查

-溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定

-特殊元素含量測(cè)定

-雜質(zhì)測(cè)定

六、耐用性

•耐用性

•典型的變動(dòng)因素

-被測(cè)溶液

-環(huán)境因素

-液相色譜法中典型因素

-氣相色譜法中典型因素

7、驗(yàn)證內(nèi)容的選擇

•非定量分析方法

•定量分析方法

•微量定量分析方法

①已有重現(xiàn) 性驗(yàn)證， 不需驗(yàn)證 卷間精密

②如一種方 法不夠?qū)?屬，可用 其他分析 方法予以 補(bǔ)充

③視具體情 況予以驗(yàn)證

8、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中分析方法驗(yàn)證示例

•阿司匹林及其片劑的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

-鑒別:

•化學(xué)鑒別法

•紅外光譜法

-檢查

•溶液的澄清度

•游離水楊酸

•溶出度

-含量測(cè)定

•酸堿滴定法

•高效液相色譜法